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牛血清白蛋白?新生牛血清浓度的选择

大家好,今天小编来为大家解答以下的问题,关于牛血清白蛋白,新生牛血清浓度的选择这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、胎牛血清和新生牛血清都是细胞常用的天然培养基。胎牛血清常用于较难养、比较娇气的细胞和干细胞,新生牛血清通常适用于比较好养的细胞,特别用于病毒疫苗的工业生产以及广泛的科研领域。在实际应用中,常需要确定牛血清的浓度。常用浓度为5%~20%,也有用更低浓度的牛血清,这主要依赖于所用的人工合成培养基的类型、组成和营养程度。如果合成培养基的营养较丰富,那么可适当降低牛血清的浓度。它也依赖于所培养的细胞类型和培养的目的。下面以水牛卵母细胞为例。

2、在2008年,广西大学等单位曾报道了不同浓度牛血清和白蛋白对水牛卵母细胞体外成熟的影响。卵母细胞的体外成熟是胚胎体外生产技术中的关键环节。

3、研究人员将经卵母细胞清洗2--3遍后,放入预先平衡过的不同浓度的牛血清(ECS,FCS,注:ECS为发情牛血清)及牛血清白蛋白(BSA)的成熟培养液中,其中对照组采用基础培养液;并放入39℃、含5%CO及饱和湿度的培养箱内培养。基础培养液为TCM199中加入一定量的激素(LH,FSH,雌二醇)。培养方式为微滴培养法,在60mm培养皿中作12~16个滴,每滴放30--40枚卵丘一卵母细胞复合体,并在培养液滴上面覆盖石蜡油。

4、研究人员观察了在基础培养液中添加不同牛血清及其浓度分别0(对照),10%ECS,20%ECS,10%FCS,20%FCS对水牛卵母细胞体外成熟的影响。结果显示:10%ECS,20%ECS,10%FCS组的细胞成熟度显著高于对照组,又以10%ECS组为突出。随着FCS血清浓度的增加,成熟度逐渐提高,但无显著差异。作者认为,添加血清是必要的,但不需太高的浓度。

5、可见,设定一个观测指标,进行浓度梯度试验,是可以找到一个最佳浓度的。

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