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灵芝孢子一般呈淡褐色至黄褐色,卵形,(8.5~11.2)μm×(5.2~6.9)μm,内含油滴。灵芝孢子油是从灵芝孢子中提取的脂质活性物,通常每20g灵芝孢子粉才能萃取出1g灵芝孢子油。灵芝孢子油集中了灵芝孢子中的三萜类、核苷类及部分多糖类化合物,是灵芝孢子有效成分的集合体。
灵芝孢子油的化学成分主要包括灵芝三萜类灵芝酸、不饱和脂肪酸、有机锗、灵芝多糖和蛋白质等。陈体强等采用气相色谱与质谱联用分析法,从超临界CO2萃取孢子油中鉴定出18种脂肪酸成分,包括6种不饱和脂肪酸、7种饱和脂肪酸、2种环链脂肪酸,以及己酸、辛酸和壬酸等短链脂肪酸[1]。定量分析结果表明,不饱和脂肪酸总量为73.6%,其中主体成分油酸(C18∶1)、亚油酸(C18∶2)和棕榈酸(C16∶0)的等含量分别为57.5%、13.4%和19.6%;不饱和脂肪酸十六碳烯酸(C16∶1)和亚麻酸(C18∶3)的含量分别为2.2%和0.5%。
胡居吾等对椴木灵芝和菌草灵芝进行比较,菌草灵芝孢子油中亚油酸和油酸占55.61%,不饱和脂肪酸占61.15%;而椴木灵芝孢子油中亚油酸和油酸占49.87%,不饱和脂肪酸占54.88%[2]。梁静等测得三萜类灵芝酸含量8%~13%[3]。李森柱等测得采用超临界CO2流体萃取的灵芝孢子油,其总三萜含量高达19.6%[4]。
灵芝孢子油有良好的抑瘤作用,其抑瘤作用呈量效关系[8]。卞嵩等试验发现灵芝孢子油对H22移植性癌细胞生长有抑制作用,3个剂量组(3.7、7.4和14.8g/kg)的抑瘤率分别是16.2%、25.8%和38.8%,其抗肿瘤作用呈现量效关系[9]。同时,灵芝孢子油能降低癌细胞中VEGF(VascularEndothelialGrowthFactor)的表达水平。原因可能是灵芝孢子油通过抑制肿瘤组织中VEGF的生成,进而抑制血管内皮细胞的增殖、迁移,影响肿瘤血管的生成以达到治疗肿瘤的作用。8g/kg·d剂量的破壁灵芝孢子组对小鼠肝癌及对肝癌组织的端粒酶活性有明显的抑制作用,能有效破坏肿瘤癌细胞端粒酶[10]
刘菊妍等研究发现,灵芝孢子油能提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力及NK细胞的杀伤作用,提高人刀豆素A(concanavalinA,conA)诱发的T细胞增殖反应[11]。卞嵩等测定了灵芝孢子油对小鼠T淋巴细胞亚群的含量变化、IL-2的活性和ConA诱导的脾淋巴细胞的增殖反应[12]。研究结果表明,灵芝孢子油可显著升高正常小鼠外周血CD4+T细胞比例,降低CD8+T细胞比例,升高CD4+/CD8+值;促进正常小鼠诱生IL-2,发挥内源性细胞因子IL-2的诱导作用;促进ConA诱导的脾T淋巴细胞增殖反应,从而提高机体的特异性免疫功能。灵芝孢子油增强免疫细胞的生理活性和恢复缺损的机体免疫系统功能,可能是其临床抗肿瘤作用的机制之一。
朱蔚文等研究发现,6-羟基多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)帕金森病(Pakinsonsdisease,PD)大鼠模型中,脑腹侧部Bax表达增强,灵芝孢子油能有效地降低其表达,并使Bcl-2表达增加,并对6-OHDA引起的黑质区神经元凋亡具有调节作用[13]。灵芝孢子油能明显抑制MPTP(1methyl4phenyl1,2,3,6tetrahydropyridine)性帕金森综合症小鼠中脑内致炎性细胞因子TNF-α(tumornecrosisfactor-α)、IL-1β(interleukin-1β)的生成,减少神经毒素诱发的黑质神经炎症反应,使DA能神经元继续存活,这可能是灵芝孢子油治疗MPTP模型的主要机制之一[14]。
沈志勇等对铝中毒小鼠使用灵芝孢子油发现,预防试验组和治疗试验组小鼠的学*记忆水平均显著提高,而且海马内神经纤维、线粒体和突触等超微结构的病理性损伤得到了明显缓解[15]。灵芝孢子油对铝中毒引起的中枢神经损伤具有一定的预防和治疗效果。研究表明,灵芝在抗衰老作用中能显著提高SOD(SuperoxideDismutase)活性,具有抗氧化和清除自由基的作用[16]。原因可能是灵芝孢子油通过抗氧化和清除自由基对铝中毒痴呆症小鼠的海马神经组织发挥保护作用,从而提高学*记忆的能力。
采用超临CO2流体萃取的灵芝孢子油,能显著降低雄性新西兰兔血清中TC(totalcholesterin)和HDL-C(high-densitylipoproteincholesterol)的浓度,病理切片结果显示,灵芝孢子油组具有减轻血管内膜下脂质沉积现象[17]。
白血病是一种常见的临床恶性肿瘤,目前常规的治疗方法仍为放疗、化疗和手术,但这些手段副作用大,对病人的免疫功能损伤很大。研究发现,灵芝孢子油体外作用于Jurkat细胞24h后,有明显的抑制细胞活力和促进凋亡的趋势,且孢子油对Jurkat细胞的诱导凋亡作用有明显的剂量效应关系,但其发挥作用的机制还不清楚[18]。
灵芝孢子油对小鼠细胞免疫功能和NK细胞活性有明显的促进作用,对CCl4诱导的化学性肝损伤具有辅助保护作用[19-20]。灵芝孢子内脂质对D-氨基半乳糖所致肝损害具拮抗作用。
2005年,钱小奇等采用干扰素-α2b联合灵芝孢子油软胶囊治疗39例慢性乙型肝炎病例为试验组,单纯用干扰素-α2b治疗42例作为对照组,结果发现,6和12个月后,治疗组的乙肝病毒脱氧核糖核酸(hepatitisbvirusDNA,HBVDNA)的转阴率均高于对照组。因此,干扰素-α2b联合灵芝孢子油胶囊可提高HBV-DNA的转阴率[21]。
破壁灵芝孢子油对雌雄小鼠经口半数致死量(LD50)均大于10g/kg·BW,为实际无毒级物质;三项(Ames,微核,精子)致突变试验结果均为阴性[22]。
灵芝孢子油作为灵芝有效成分的精华,近年来其研究逐渐增多。灵芝孢子油的药理作用机理与灵芝孢子有很多相似之处,因其不饱和脂肪酸含量很高,可以增强其改善心脑血管疾病、降血脂、降胆固醇的作用。随着现代医学的发展,人们开始认识到自身整体的健康状况对疾病的重要性,开始注重整体的调节。研究表明,灵芝孢子同时具有抗肿瘤和免疫调节的功效,而灵芝孢子油是灵芝孢子的内脂质成分,富集了灵芝孢子中的灵芝酸、不饱和脂肪酸、有机锗、灵芝多糖等有效成分,从成分上推断灵芝孢子油具有更好地抗肿瘤和提高免疫力的功效。而灵芝孢子油对机体免疫系统调节作用的报道极少,用现代免疫学的方法,研究灵芝孢子油的免疫作用,阐明灵芝孢子油的免疫药理治疗作用,对防治有关疾病,具有重要意义。
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